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Quasar 705 T Amidite，Quasar 705 T 核苷酸酰胺化试剂，化学特性

中文名称：
Quasar 705 T 核苷酸酰胺化试剂（Quasar 705 T Amidite）

主要应用及学术介绍：

Quasar 705 T Amidite 是一种高度功能化的荧光标记核苷酸中间体，专门用于寡核苷酸的固相合成（Solid Phase Oligonucleotide Synthesis, SPOS），具有长波长近红外荧光特性。其化学结构通过荧光团 Quasar 705 的引入，使得核苷酸在合成过程中获得可视化和光学追踪功能，而 Amidite 功能化确保其在 SPOS 中高效偶联。该试剂在分子生物学、基因检测、荧光原位杂交（FISH）、分子探针构建及多模态成像研究中均具有广泛应用。

一、分子结构与化学特性

Quasar 705 T Amidite 由三个主要组成部分构成：

荧光团（Quasar 705）：一种长波长近红外荧光染料，激发波长约为690–695 nm，发射波长约为705–710 nm。长波段荧光的优势在于减少生物体系自发荧光干扰，提高信噪比，并且适合活体组织成像及深层细胞成像。

核苷酸骨架：T（胸腺嘧啶）核苷酸结构提供与 DNA/RNA 链的兼容性，使其可整合到寡核苷酸链中。胸腺嘧啶的化学稳定性高，不影响荧光团性能，保证荧光信号在链内环境中稳定。

Amidite 功能化基团：通过二异丙基氰基磷酸酯化（diisopropyl cyanoethyl phosphoramidite）连接到核苷酸的 3’ 或 5’ 羟基，确保在固相合成过程中高效偶联，生成稳定磷酸二酯键。Amidite 结构在干燥条件下稳定，适用于多轮合成循环。

Quasar 705 T Amidite 的结构特点决定了其在化学反应中表现出高度的选择性和稳定性。荧光团在偶联反应中保持完整性，避免光漂白或电子破坏，同时 Amide 键和磷酸二酯键在合成后保持长效稳定性，使标记后的寡核苷酸可在体内外实验中长期保持荧光信号。

二、主要应用及优势

荧光标记寡核苷酸构建
Quasar 705 T Amidite 可通过 SPOS 固相合成整合到 DNA 或 RNA 链中，实现高效荧光标记。标记位置可在 5’ 末端、3’ 末端或内部碱基上进行设计，实现定向标记和空间控制。长波长荧光避免传统荧光素染料的自发荧光干扰，提高检测灵敏度，特别适合在复杂生物样品或组织切片中应用。

分子探针与 FISH 应用
在荧光原位杂交（FISH）实验中，Quasar 705 T 标记的寡核苷酸探针可用于染色特定核酸序列。近红外波段的荧光信号使多通道成像更加清晰，可同时与其他荧光标记探针组合，实现多重原位检测。其高光稳定性和水溶性保证了探针在杂交实验中的信号强度和可重复性。

活细胞和深层组织成像
长波长的 Quasar 705 荧光团穿透力强，适合用于活细胞标记及深层组织成像。通过将 Quasar 705 T 融入寡核苷酸探针，可在活细胞内追踪 RNA 或 DNA 动态过程，如 mRNA 定位、RNA 干扰实验追踪或基因表达调控研究。其光稳定性使连续成像和动态观察成为可能。

多模态实验与高通量检测
Quasar 705 T Amidite 可与其他荧光染料组合，进行多通道共聚焦成像、流式细胞术分析及高通量分子探针检测。单一荧光团的可控整合性保证信号一致性，有利于多模态实验数据定量化分析。

药物和功能分子偶联
通过合成过程中引入 Quasar 705 T，可构建功能化寡核苷酸药物或信号分子。例如，将荧光标记的 siRNA、反义寡核苷酸或 Aptamer 与目标蛋白结合，可实现荧光追踪、靶向验证及药物递送监测。Amidite 的高反应活性和荧光团稳定性保证偶联后分子的功能性不受损。

三、操作特点与注意事项

固相合成兼容性
Quasar 705 T Amidite 完全兼容传统固相 DNA/RNA 合成流程，包括偶联、氧化、去保护及洗脱步骤。其结构设计保证荧光团在酸性和有机溶剂条件下稳定，不受 SPOS 循环条件影响。

水溶性与光敏性管理
尽管 Quasar 705 荧光团具有水溶性，但在强光或高温条件下易发生光漂白。实验操作需避光，并使用干燥或缓冲溶液保存。

纯化与分析
合成后的标记寡核苷酸通常需通过高效液相色谱（HPLC）纯化，并通过质谱（MS）或紫外-可见光光谱确认荧光团整合和纯度。长波长荧光的检测可避免生物样品背景干扰，提高定量精度。

四、应用实例

基因表达监测：将 Quasar 705 T 标记的探针用于实时 PCR 或 RNA FISH，实现靶基因定位和动态追踪。

多重杂交实验：结合其他荧光染料（如 FAM、Cy3）进行多通道标记，实现核酸多重检测。

活细胞成像：标记 siRNA 或 miRNA 探针，可在活细胞内观察基因沉默或调控过程，辅助药物筛选和分子机制研究。

纳米材料功能化：Quasar 705 T 可整合到核酸纳米结构中，实现荧光追踪与功能化材料构建，为智能纳米载体研究提供工具。

总结

Quasar 705 T Amidite 是一种高性能的荧光标记核苷酸中间体，将近红外荧光团 Quasar 705 与胸腺嘧啶核苷酸结合，通过 Amidite 功能化实现高效固相合成。其主要优势在于长波长荧光、高光稳定性、可控偶联及广泛的生物兼容性，使其在荧光探针构建、核酸标记、FISH 实验、活细胞成像及多模态分子研究中具有重要应用价值。随着基因检测技术和分子成像技术的发展，Quasar 705 T Amidite 将在高灵敏度核酸探针、分子诊断及功能性分子标记领域发挥更加关键的作用，为现代分子生物学研究提供可靠的实验工具。