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调节性 T 细胞

调节性 T 细胞（简称 Tregs）是免疫系统中负责调控功能的 T 细胞亚群，核心作用是维持免疫平衡，其功能异常与自身免疫病、肿瘤、感染等多种疾病密切相关，是近年免疫领域的研究热点。​

一、Tregs 的定义与核心功能​

Tregs 全称 “调节性 T 细胞”，属于 CD4⁺T 细胞（辅助性 T 细胞）的分支，核心特征是表达特异性转录因子 Foxp3，同时表达 CD25 等表面分子，Foxp3 是识别 Tregs 的特异性标志。​

其核心功能包括：​

1,抑制过度免疫反应，避免免疫系统攻击自身组织，减少自身免疫病的发生；​

2,调控免疫应答强度，避免免疫反应对正常组织造成损伤；​

3,参与免疫耐受形成，降低器官移植后的排斥反应风险。

​

二、Tregs 的两大主要类型​

根据来源和分化方式，Tregs 主要分为两类：​

1,天然 Tregs（nTregs）​

起源于胸腺，发育过程不依赖外界细胞因子；​

占外周血 CD4⁺T 细胞的 5%-10%，具备天然的免疫抑制功能，主要作用是预防自身免疫病。​

2,诱导性 Tregs（iTregs）​

起源于胸腺迁出的普通 CD4⁺T 细胞，在特定条件下（如 TGF-β、IL-10 等细胞因子刺激或同源抗原作用）分化形成；​

主要存在于肠道、肺部等外周组织，负责调控局部免疫反应，参与感染后炎症调控及组织稳态维持。​

三、人与小鼠 Tregs 的关键差异​

免疫研究中常用小鼠作为模型，人与小鼠的 Tregs 存在核心差异：​

小鼠 Tregs：CD4⁺CD25⁺T 细胞群体均一，几乎全部具备免疫抑制功能；​

人类 Tregs：CD4⁺CD25⁺T 细胞群体异质性强，并非所有细胞都具有抑制功能，仅高表达 CD25 的 CD4⁺T 细胞（约占总 CD4⁺T 细胞的 2%-3%）具备显著免疫抑制活性，低至中等表达 CD25 的细胞无明显抑制功能。​

四、Tregs 的表型鉴定关键标志​

（一）核心标志 Foxp3​

Foxp3 是胞内转录因子，为 Tregs 特异性标志。小鼠中，Foxp3 基因缺陷可导致淋巴细胞增生性疾病；人类中，Foxp3 基因缺失或突变会引发免疫失调性多内分泌病 - 肠病 - X 连锁综合征（IPEX）。除 CD4⁺T 细胞外，CD8⁺T 细胞在特定条件下也可表达 Foxp3，且具备免疫调节功能。​

（二）人 Tregs 的关键标志 CD127​

低表达 CD127 是鉴定人 Tregs 的重要指标，其表达水平与 Foxp3 高度相关，CD4⁺CD127^loCD25^int/hi 细胞即为 Tregs。​

CD127 作为表面标志，检测时无需固定和破膜，可保持细胞活性，便于后续体外培养或功能实验。联合 CD127^lo 与 CD25^int/hi 分选 Tregs，回收率较单独使用 CD25^high 分选提升 2-4 倍，且能减少非特异性细胞污染。​

（三）常用表面标志汇总​

人类 CD4⁺Tregs：GITR、CTLA4、CD39、CD62L、CD127、CD103、LAG3（可联合 CD45RA 表达）；​

小鼠 CD4⁺Tregs：FR4^hiCD25⁺为天然 Tregs，FR4^loCD25⁺为效应 T 细胞，FR4^hiCD25⁻为记忆 T 细胞，CD25⁻CD4⁺为初始 T 细胞。​

六、科研常见问题​

Q1：研究人 Tregs 时，为何不能直接使用小鼠的 CD25⁺分选策略？​

A1：小鼠 CD4⁺CD25⁺T 细胞均为功能性 Tregs，而人类 CD4⁺CD25⁺T 细胞异质性强，仅高表达 CD25 的细胞具备抑制功能，直接照搬会导致实验准确性下降。​

Q2：检测人 Foxp3 时，样本可保存多久？人与小鼠的染色缓冲液能否互换？​

A2：人 PBMCs 在 - 80℃条件下，用人 Foxp3 缓冲液保存 24-72 小时仍可染色；人与小鼠的 Foxp3 染色缓冲液不建议互换，需使用对应物种推荐的缓冲体系以保证染色效果。​

Q3：同时检测人胞内细胞因子（IFN-γ、IL-4、IL-17A）和 Foxp3 时，如何选择缓冲液？​

A3：共染 IFN-γ、IL-17A 与 Foxp3 时，推荐使用 Foxp3 缓冲液体系；共染 IL-4 与 Foxp3 时，使用 BD Cytofix/Cytoperm buffer 效果更优。​

Q4：Foxp3 染色能否直接用于人全血细胞样本？​

A4：可以。通过对全血进行溶解、固定、破膜处理，可获得足够数量的细胞用于检测，适用于临床样本快速分析。