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GST Pull-down是验证蛋白互作的方法之一，常常被用来验证蛋白之间的直接相互作用，除了点对点验证已知的相互作用外，GST Pull-down还可以与液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）分析筛选互作蛋白，即GST Pull-down MS，该方法是通过将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽填料上，充当一种“诱饵蛋白”，与靶蛋白能够相互作用的蛋白就会被拉下。将提取的总蛋白过柱，可捕获与“诱饵蛋白”相互作用的蛋白，洗脱结合物后通过色谱串联质谱（LC-MS/MS）分析，从而筛选出未知互作蛋白。

背景说明

蛋白质相互作用是生命活动的核心机制，其与肿瘤、神经退行性疾病等密切相关。传统IP技术受限于抗体特异性，GST-PullDown技术通过体外互作体系，可精准捕获直接相互作用。结合高分辨质谱技术，实现未知互作蛋白的深度挖掘。

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实验原理

GST Pull-down MS，通过将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽填料上，充当一种“诱饵蛋白”，与靶蛋白能够相互作用的蛋白被拉下。将提取的总蛋白过柱，捕获与“诱饵蛋白”相互作用的蛋白，通过色谱串联质谱（LC-MS/MS）分析，可筛选出未知互作蛋白。

图 GST Pull-down MS原理

服务流程

客户在线下单——订单/实验材料确认——样品制备——酶解消化——肽段纯化——质谱分析——数据检索——生物信息学分析——项目报告

服务内容及说明

适用场景

验证蛋白直接相互作用；

发掘未知互作蛋白；

信号通路与分子机制研究等。

实验周期

致电详询。

实验交付内容

1.实验原始数据；

2.生物信息学分析；

3.结题报告等。