根据牛出生时间和血清采制分离方法,血清一般分为胎牛血清、新生牛血清和小牛血清。
胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)一般为八月龄胎牛心脏穿刺取血再经热灭活、透析、过滤除菌后制成,是一种外观浅黄色、无溶血、无异物略粘稠液体。胎牛血清中含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常被用于增殖细胞,也用于细胞系和原代培养。
博奥龙杂交瘤细胞专用胎牛血清(货号BF08005),通过杂交瘤专业优化获得、批间差小,价格介于国产血清与进口血清之间,无需筛选。
常见问题解答
Q:血清中的沉淀是什么?为什么不同批次看到的沉淀不一样?
A:血清中出现的絮状沉淀多为纤维蛋白正常析出物。由于不同动物或个体血液中的纤维蛋白原含量存在差异,因此不同批次的血清在解冻后可能表现出不同程度的纤维蛋白析出,这属于正常现象,不影响血清的实际使用效果。
👉此外,若血清在37℃水浴中解冻时间过长,也可能形成沉淀,此类沉淀通常为磷酸钙结晶,同样不会影响血清的功效。
🔓备注:无论血清中是否存在可见沉淀,都建议在配置完全培养基后进行充分的接种与培养预实验。通常可将测试细胞与完全培养基在37℃培养箱中共同培养过夜,以验证其适用性。
Q:这款血清是否经过脱脂处理?
A:该产品未经过脱脂处理,属于常规胎牛血清,并非低脂胎牛血清。
🌟低脂胎牛血清通常通过固体基质等脱脂工艺,去除内源性脂类、甘油三酯和胆固醇,显著降低脂质含量,有助于减少对脂质敏感实验的干扰,适用于脂质代谢研究、脂肪肝模型构建或降脂药物筛选等相关实验。
Q:胎牛血清使用前是否可以直接在37℃水浴锅中化冻?
A:如时间充裕,推荐采用逐步解冻法:先将血清置于2–8℃冰箱中解冻过夜,再转移至室温或37℃水浴锅中回温,并在此期间定期轻轻摇匀,以减少沉淀生成、保证血清质量。
👋不建议将血清从-20℃或-70℃直接放入37℃水浴锅中解冻。温度急剧变化易形成较多冷沉淀(指在冷冻的血清中因解冻而析出的富含纤维蛋白原等凝血因子的固体沉淀),此类沉淀通常不可溶。此外,不建议通过过滤方式去除冷沉淀,以免造成生长因子、有丝分裂原及其他蛋白质等营养成分的损失。
Q:血清使用前需要在56℃热灭活30分钟吗
A:除非实验明确要求,否则一般不建议进行热灭活处理。
热灭活主要用于破坏血清中的补体活性。补体是一类对热敏感的血浆蛋白,可能介导细胞溶解、平滑肌收缩,并激活淋巴细胞和髓系细胞,从而干扰免疫学分析等特定实验。若您的实验涉及免疫学应用,或培养胚胎干细胞、昆虫细胞及平滑肌细胞,可考虑采用热灭活。
🔔需要注意的是,胎牛血清中某些补体成分(如C1、C6)的含量仅为成年动物血清的1%–3%,有时甚至难以检出。此外,细胞培养液在常规预热过程中,也可能会对热敏感补体产生一定的灭活作用。有部分实验表明,即使进行了热灭活,对细胞生长的改善效果也较为有限。
💡然而,热灭活过程可能对血清质量产生负面影响:高温易导致部分必需血清蛋白变性,降低细胞生长速率;同时会使沉淀物(显微镜下可见的“小黑点”)显著增多,易被误判为微生物污染。此外,灭活过程中若温度控制不均、时间过长或摇晃不充分,均可能进一步损害血清品质。
⭐因此,我们建议仅在必要时进行热灭活,并严格控制加热条件(56℃、30分钟,水浴中均匀受热)。若无特殊要求,省略该步骤既可节省时间,也有助于维持血清的最佳性能。
Q:血清可以保存多久?应该如何储存?
A:若储存与处理方式得当,血清的性能可多年保持稳定。博奥龙产品均提供1年保质期保障。不当的储存或解冻会降低血清的即时及长期稳定性,影响其有效性。推荐储存条件如下:
01需长期保存时,应置于-20℃或-70℃低温冰箱中;
02如需短期保存,可存放于2–8℃冰箱,但不宜超过一个月;
03应避免反复冻融,以免加速血清中营养物质的降解。建议将解冻后的血清进行分装,并保存于-20℃。注意:血清结冰时体积会膨胀约10%,分装时须预留足够空间,否则可能造成污染或容器冻裂。